TOP泉州盤點-藍白斑篩選的原理
時間: 2023-09-16 泉州中科白癜風(fēng)醫(yī)學(xué)研究院【官網(wǎng)】
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藍白斑篩選原理圖解,藍白斑篩選的原理及應(yīng)用
藍白斑篩選是一種常見的基因工程技術(shù),它可以被用來快速、準(zhǔn)確地鑒定純合或雜合突變體。
藍白斑篩選原理如下:質(zhì)粒DNA中通常會含有兩個關(guān)鍵基因:一是β-半乳糖苷酶(Galactosidase),它是一種酶,能夠?qū)⒁粋€特定的底物X-Gal轉(zhuǎn)變?yōu)樗{色的產(chǎn)物,從而形成藍色斑點,是一個可見的標(biāo)記;另一個是谷氨酰胺合成酶(Ampicillin),它是一種抗生素,能夠抑制細菌的生長。
在藍白斑篩選中,會將DNA突變體插入到這兩個基因之間,突變體會對其中一個或兩個基因產(chǎn)生影響。如果插入突變體對β-半乳糖苷酶基因產(chǎn)生了破壞作用,那么細菌對X-Gal的轉(zhuǎn)化就會失活,從而無法生產(chǎn)出藍色的產(chǎn)物,細胞在培養(yǎng)基上就不會形成藍色斑點;反之,如果插入突變體對谷氨酰胺合成酶基因產(chǎn)生破壞作用,那么細菌在含有抗生素的培養(yǎng)基中就會失活,只有那些含有突變體的細胞能夠生存下來。
通過這種方法,我們可以輕松地鑒定突變體的純合性或雜合性,并對其進行后續(xù)實驗研究。同時,這種方法也被廣泛地應(yīng)用于基因工程領(lǐng)域中的基因克隆、表達、定位和突變等研究中,是一種非常有效的技術(shù)手段。
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